1.標準品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑藴势芬恢?，用?hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
120ng/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
60ng/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
30ng/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
15ng/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
7.5ng/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
4.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時(shí)藍色立轉黃色）。
5.測定：以空白空調零，450nm波長(cháng)依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以?xún)冗M(jìn)行。
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