通過(guò)結晶紫初染和碘液媒染后，在細胞壁內形成了不溶于水的結晶紫與碘的復合物，革蘭氏陽(yáng)性菌由于其細胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密，故遇乙醇或丙酮脫色處理時(shí)，因失水反而使網(wǎng)孔縮小，再加上它不含類(lèi)脂，故乙醇處理不會(huì )出現縫隙，因此，能把結晶紫與碘復合物牢牢留在壁內，使其仍呈紫色；而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類(lèi)脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差，在遇脫色劑后，以類(lèi)脂為主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結晶紫與碘復合物的溶出，因此通過(guò)乙醇脫色后仍呈無(wú)色，再經(jīng)沙黃等紅色染料復染，就使革蘭氏陰性菌呈紅色。
革蘭氏染色液試劑盒體外診斷試劑產(chǎn)品用法：
1.涂片經(jīng)火焰固定，加（結晶紫溶液）溶液A染1分鐘，用清水沖去染液。
2.加（碘液）溶液B染1分鐘，水洗。
3.加（95%乙醇）溶液C，不時(shí)搖動(dòng)玻片約10-30秒，至無(wú)紫色脫落為止，水洗。
4.加（沙黃復染液）溶液D，染1分鐘，水洗。
5.干后油鏡鏡檢。陽(yáng)性菌呈紫色、陰性菌呈淡紅色。
革蘭氏染色液試劑盒體外診斷試劑微生物靈敏度試驗:
按標簽用法制備培養基，接種以下質(zhì)控菌株，放置/℃/培養/小時(shí)。
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