管裝培養基使用商品化脫水合成培養基制備培養基時(shí)，應嚴格按照廠(chǎng)商提供的使用說(shuō)明配置。記錄所有相關(guān)數據，如質(zhì)量/體積、pH、制備日期、滅菌條件和制備人員等。

 

    管裝培養基使用各別成分制備培養基時(shí)，應按照配方準確配制，記錄所有細節信息，如；培養基名稱(chēng)和類(lèi)型及試劑級別、每個(gè)成分物質(zhì)含量、制造商、批號、pH、培養基體積（分裝體積）、無(wú)菌措施（包括實(shí)施的方式、溫度及時(shí)間）、配置日期、人員等，以便潮源。

 

    1.水

 

    除特定要求，實(shí)驗室用水的電導率在25℃下應不高于25uS/cm（相當于電阻率≥0.4MΩcm）。

 

    微生物污染應不超過(guò)103CFU/mL，低于102CFU/mL。應根GB/T 5750.12或其他有效方法，定期檢驗微生物的污染。

 

    2.稱(chēng)量和復水

 

    管裝培養基稱(chēng)量所需量的脫水培養基（注意防止吸入粉末，尤其是含有有害物質(zhì)的培養基粉末），先加入少量水，充分混合（注意避免培養基結塊）后再加水至所需的量。

 

    3.溶解和分裝

 

    脫水培養基加水后適當加熱，并不攪拌使其快速溶解，必要時(shí)，重新溶解。含瓊脂的培養基在加熱溶解前應浸泡幾分鐘。

 

    4.pH的測定和調整

 

    用pH計測定pH,必要時(shí)在滅菌前調節pH，除特殊說(shuō)明外，培養基滅菌后冷卻至25℃時(shí)，要求pH的變化不超過(guò)0.2pH單位。通常使用濃度約為40g/L（ 約1 mol/ L）的氫氧化鈉溶液或濃度約為36.5g/L（約1mol/L）的鹽酸溶液調節pH。如果滅菌后調節pH，溶液需滅菌。

 

    注：商品化培養基在高壓滅菌前后pH可能發(fā)生明顯變化，但使用蒸餾水或去離子水時(shí)，滅菌前無(wú)需調節pH。

 

    5.分裝

 

    將配置好的培養基分裝到適當的容器中，容器的體積至少為體積的1.2倍。

 

    6.滅菌

 

    ①概述

 

    管裝培養基和試劑的滅菌通常采用濕熱滅菌或過(guò)濾滅菌。

 

    有些培養基無(wú)需高壓滅菌，可煮滅菌。如，含亮綠的腸道菌培養基對光和熱特別敏感，應在煮沸后快速冷卻，避光保存。同樣，一些試劑則不需要滅菌，直接使用（參見(jiàn)相關(guān)標準或生產(chǎn)廠(chǎng)商的使用說(shuō)明）。

 

    ②濕熱滅菌

 

    濕熱滅菌在高壓鍋或培養基制備器中進(jìn)行。高壓霉菌一般采用121℃±3℃霉菌15min。如果培養基的體積超過(guò)1000mL，要對滅菌條件進(jìn)行適當的調整。所有操作均要按照標準和使用說(shuō)明的規定進(jìn)行。

 

    注：大容量培養基（＞1000mL）滅菌時(shí)可能會(huì )造成過(guò)度加熱。

 

    加熱后應采取適當的方式冷卻，防止沸溢。這對大容量培養基和敏感性培養基（如含亮綠的培養基）是非常重要的。

 

    ③過(guò)濾滅菌

 

    過(guò)濾滅菌可以在真空負壓或正壓條件下進(jìn)行。使用無(wú)菌設備和0.2um孔徑的濾膜。將過(guò)濾裝置的各個(gè)部分消毒滅菌，或使用預消毒設備。

 

    一些濾膜上附著(zhù)蛋白質(zhì)或其他物質(zhì)。為達到有效過(guò)濾，應事先將濾膜用無(wú)菌水潤濕。

 

    ④監測

 

    應對經(jīng)濕熱或過(guò)濾滅菌的培養基進(jìn)行監測，尤其要對pH、色澤、滅菌效果和均勻度等指標進(jìn)行監測。

 

    7.添加劑的制備

 

    制備含有有毒物質(zhì)（特別是抗生素）時(shí)應小心操作，避免因粉末的擴散造成實(shí)驗人員過(guò)敏或發(fā)生其他不良反應。采用適當的預防措施并小心按照產(chǎn)品使用說(shuō)明操作。不要使用過(guò)期的試劑；抗生素工作溶液現配現用；批量配置的抗生素溶液分裝后向冷凍保存，但解凍后的貯存溶液不可再次冷凍；廠(chǎng)商應提供冷凍對抗生素活性影響的相關(guān)資料，也可由使用者自行測定。